程序降温盒多久能降到-80

程序性冻存盒4个小时能到-80，走程序降温盒过程，在—80度存放4个小时就可入液氮(程序降温盒在一个半小时即可从室温降至—80度)。

程序降温盒一个半小时能降到-80。

程序降温盒是一般最广泛使用的降温法，为一种特制冷冻容器，使细胞以每分钟约-1摄氏度的速度降至-80摄氏度（过夜），然后移至液氮中保存。

程序降温盒运用于各种细胞类型，包括干细胞，原代细胞、细胞系和酵母等。

程序降温盒不需要任何液体及添加剂的辅助，只需要放入到超低温冰箱，就能确保降温盒中样品的降温速率为每分钟-1摄氏度，是一个非常理想的细胞保存组合。

产品采用径向对称设计配合复合泡沫及贵重合金，具有零添加零排放的特点，并且不需要更换任何部件就能永久性使用，真正响应到绿色环保的号召。

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程序性冻存盒多久能到-80

程序性冻存盒多久能到-80，程序性冻存盒4个小时能到-80，走程序降温盒过程,在—80度存放4个小时就可入液氮(程序降温盒在一个半小时即可从室温降至—80度)。另有书中提到走泡沫盒子的程序,细胞置于—80度冰箱可最长达一周时间。

程序降温盒放室温多久可以用

将程序降温盒放入-80℃冰箱,冷冻4小时以上以达到冻存效果即可使用。

程序性降温时间

程序性降温时间16-18h。程序性降温：4℃10min，-20℃30min。-80℃16-18h。程序性降温主要是通过微处理器控制系统和电磁阀，控制喷入腔体中的液氮量来精确控制降温速率。其优点是：控温精确，受外界环境影响小，尤其是处理大体积样本时，快速喷入的大量液氮更易带走样本中的潜热，从而快速降温，保证更好的样本复苏活性。

程序降温盒能放-20吗

不能。

程序降温盒：液氮或低温储存（只要低于-135℃即可）。程序降温盒：是一般最广泛使用的降温法，为一种特制冷冻容器，使细胞以每分钟约-1℃的速度降至-80℃（过夜），然后移至液氮中保存。

程序降温盒中途若是打开会怎么样

温度升高。破坏盒中细胞。程序降温盒使用的降温法，为一种特制冷冻容器，使细胞以每分钟约-1℃的速度降至-80℃（过夜），然后移至液氮中保存。再冷冻的过程中不能开盒，开盒会使温度升高，破坏盒中培养的细胞。导致实验结果有误差甚至失败。

异丙醇冻存盒放-80冰箱栋多久

8小时。将冻存管放入异丙醇降温盒，再将降温盒放入零下80度的冰箱，8小时后，利用异丙醇比热容大的特点，使被冻存的细胞实现缓慢降温。冰箱是保持低温的一种器具，通过使食物或其他物品保持恒定低温冷态以避免其。

细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里，但是没有立刻放-80……

会有些影响，在活率方面。70%的细胞应该没问题。

1）传统方法: 冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h

(或隔夜)--->液氮中长期储存。

注意：-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

（2）程序降温：利用已设定程序的程序降温仪以-1～-3℃/min的速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮中长期储存。

细胞培养|细胞冻存技术原理

1. 细胞冻存是将细胞储存在低温环境中，减少细胞代谢，实现长期储存的一种技术。

2. 在大多数细胞系中，细胞会随着衰老和演化不断的积累改变，造成表型和基因型的“培养漂移”，在冻存过程中，适当的操作和合适的冻存条件可以减少细胞特性的改变或丢失，起到细胞保种的作用。因而，正确且成功的冻存对于细胞的长久应用起着非常重要的作用。

1. 当温度低至-70℃时，细胞内的酶活性全部停止，代谢活动停止，故实现长期保存的目的。

2. 随着温度降低，细胞内外的水分都会结晶，所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏，从而引起细胞死亡，特别是0~-20℃的阶段，冰晶呈针状，及其引发细胞损伤。在不加任何保护剂条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。

3. 常见的冷冻保护剂是甘油或二甲基亚砜（DMSO）。DMSO能快速穿透细胞膜进入细胞，降低冰点，延缓冻存过程，同时增加细胞膜的通透性，提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而达到保护细胞的目的。

1. 细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。

2. 对特别敏感的细胞在冻存时需测试适用的冻存液。例如神经元细胞冻存时需选择无血清冻存液，避免复苏后分化。

· 有限细胞系形态及代谢活动维持

· 珍贵细胞保种

· 细胞株标准品制备

· 脐带血干细胞、NK细胞冻存

1. 用来冻存的细胞一般选择在细胞对数生长期，汇合度约 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。

2. 对培养物进行微生物污染物检测，特别是支原体，确保细胞没有任何的污染。在细胞的收集过程中，实验操作要尽可能的温和，避免细胞受损。

1. 细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。

2. 梯度降温法：4℃-30 min，20℃- 2h，-80℃冰箱冷冻过夜，次日将冻存管转移到液氮罐中长期保存。

3. 细胞程序降温盒，将准备好的细胞冻存管放进冻存盒，直接在-80℃过夜后就可以转移至液氮罐中。

4. 在转移存放位置的过程中一定要迅速，转移时建议将冻存管放在干冰中恒温，尽量避免转移过程因温度变化对细胞活力的影响。

1. 细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

2. 细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。

3. 液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。

HyCyte™冻存液是一种即用型、无血清、无需程序降温的细胞“长期”冻存液，该产品配方使用已超过15年，原料均从日本进口，冻存品质与日本产品一致。

·  安全： 无血清，不含异种动物成份

·  广谱： 适合多种细胞类型

·  高效： 复苏后细胞保持高活性及快速增殖  能力，不影响细胞功能

·  方便： 即用型，无需额外配制，无需程序降温盒及稀释

细胞膜保护剂—可在细胞膜外瞬间形成一层保护膜，保护细胞不受细胞外冰晶的损害。

渗透性保护剂—可迅速渗透至细胞内部，防止细胞内部产生大量冰晶，同时可保护细胞器，减少其在低温下的损伤。

细胞沉降稳定剂—可平衡细胞沉降速度，防止细胞在冻存过程中聚集成团。

用梯度降温冻存盒降温需要多长时间降到

异丙醇易挥发，并且容易吸收空气中的水分，所以在冷冻细胞的过程中可以辅助实现缓慢降温，直接从室温放进-80可以达到近似于1度/分钟。

细胞冻存盒中的异丙醇的作用是什么？为什么可以直接放在负80的冰箱中，自己就可以缓慢降温呢？ 缓慢

一般冻存盒中加入甘油的居多吧。丙二醇，异丙醇加入后，一方面防止由于溶液效应而使细胞脱水及蛋白质变性；另一方面在稍低于溶液冰点时人工强行诱导结冰，以免出现溶液过冷现象，防止结冰时释放潜热引起温度回升，以及形成大的冰晶，减轻对细胞的损伤。在一步冷冻中．选用高浓度的渗透性保护剂组成的玻璃化溶液，在冷冻过程中，不发生结晶而形成玻璃样固体，维持液态时的正常分子与离子分布，使细胞内发生玻璃化而起到保护作用。