色谱柱使用前应如何处理

1、使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。原则上，用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由、缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的（特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时）流动相进行分析时，如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小，不先冲洗掉，接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时，缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出，沉积下来，这将可能导致上述对色谱柱的损害。

2、使用后的处理：用与分析时含水比例相同的流动相（与分析用流动相唯一的区别是，用于冲洗的流动相不含缓冲盐）进行冲洗约30min，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳。用与分析时含水比例相同的流动相（与分析用流动相唯一的区别是，用于冲洗的流动相不含缓冲盐）进行冲洗约30min，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳.缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。

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1、使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。原则上，用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由、缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的（特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时）流动相进行分析时，如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小，不先冲洗掉，接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时，缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出，沉积下来，这将可能导致上述对色谱柱的损害。

2、使用后的处理：用与分析时含水比例相同的流动相（与分析用流动相唯一的区别是，用于冲洗的流动相不含缓冲盐）进行冲洗约30min，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳。用与分析时含水比例相同的流动相（与分析用流动相唯一的区别是，用于冲洗的流动相不含缓冲盐）进行冲洗约30min，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳.缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。

新买的高效液相色谱柱在正式使用之前需要做什么？比如什么配比的流动相冲洗？

新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点：

1：用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时；

2：在1的步骤下，使用甲醇：水=1：:9 作为流动相冲洗柱子30分钟以上；

3：完成上面2步才能用流动相冲洗柱子30分钟以上。再进样。

上面得甲醇为色谱级，水一般选择超纯水、二次蒸馏水。流动相都需过0.45um的膜过滤、脱气才可以使用。

另外：流动相应选择合适的PH更好的保护柱子

很长时间不用的色谱柱要用了，需要做什么前处理么？

如果色谱柱的堵头，两边都密封得很好的话应该没什么问题。

可以先拿甲醇或者乙腈，低流速，0.4-0.6ml/min冲洗半个小时。然后在用甲醇水冲开。长时间不用，柱子里面的甲醇或者乙腈有可能挥发掉了，到时候就可能会干了。先用低流速冲一阵子，免得对填料有损伤。

新色谱柱第一次使用需要注意些什么

第一次使用前，最好先处理一下。我们一般是用65%的乙腈/水溶液在0.1-0.5ml/min低速的情况下冲20min，这一过程最好别接检测器。然后，再渐渐将流速调至1ml/min继续冲2-8小时。

平时使用的时候，注意色谱柱适用的PH值范围、水相的比例（长时间使用水相比例高的流动相会损伤ODS柱）。在使用含有缓冲盐的流动相时，更换前要注意用含水量较多的甲醇过渡，使用完毕后也要含水量较多的甲醇过渡冲洗。

高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱

高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱

前提条件是使用的反相色谱柱（C8、C18及其衍生等）,不知道你用的什么柱子

1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍（推荐值）柱体积,应考虑柱前仪器的死体积（约5-10ml）,可以不接柱子大流速3-5ml/min,冲3-5分钟,然后更换流动相即可.

2、使用后用可用80%甲醇冲洗保存,如果长期不使用,建议用纯甲醇或乙腈保存.

原则上是根据流动相组分不要在柱子中产生难溶有机盐类.

样品溶液进色谱柱前应做如何处理

样品溶液进色谱柱前应这样处理：

样品预处理应包括进样前的一切操作。除了称重、溶解、稀释等步骤外,样品需要: ①过滤; ②萃取; ③衍生化(柱前衍生) ; ④液相色谱(低压柱层析) 。这些操作可以是手工进行或实行自动化操作。样品预处理的目的是除去干扰物、增加检测器灵敏度(富集) 、保护色谱柱等。

样品预处理同时也是为了避免色谱分离故障,其中样品萃取是关键的一步,要从大量的干扰物中萃取出微量组分难度极大。

有些样品经预处理后还不能作进样分析,需进行衍生化处理,使一些无紫外吸收或无荧光的组分,经过衍生化后能用紫外和荧光检测器检测,这样既提高了灵敏度,又改善了分离度(质量变化) 。样品预处理的同时也会带来一些问题,如样品损失、样品被污染、衍生化反映不完全或多种反应物生成等。衍生反应常会影响试验的精确度,或者在整个样品预处理过程中带来误差。

用于液相色谱分析的样品溶液必须均匀而无颗粒,有颗粒会损坏进样器并阻塞柱头。处理好的样品在准备上柱前应对准光线摇动,检查样品溶液中有无颗粒。

色谱柱管的预处理步骤有哪些？

HPLC色谱柱应使用原供应商提供的性能测试报告上规定的流动相进行冲洗，冲洗时流速由0.1ml/min开始每隔20～30min上调0.1ml/min直到比正常使用时流速高0.2～0.3ml/min时为止。并在每个流速段记下压力值，压力不得高于供应商提供的性能测试报告上显示的值（与相同流速时的比较），如果压力高于柱效测试报告上显示的值，则该色谱柱按不合格做退货处理。将测试过程记录在《色谱柱验收记录》第Ⅱ部分上。

GC色谱柱的预处理

填充柱的柱管在使用前应该经过清洗处理和试漏检查。清洗的方法与柱管材料有关。对于不锈钢管，通常先用10%热氢氧化钠水溶液浸泡，抽洗除去管内壁的油污，然后用自来水洗至中性。如果用1:20的稀盐酸水溶液重复处理一次，则可显著降低柱内壁的吸附作用。玻璃柱的清洗可参照上面所述的方法，不同的是通常使用洗液浸泡。同样，为了减少玻璃内壁的活性，可以用5%二甲基二氯硅烷的甲苯溶液浸泡处理，然后用甲苯和甲醇分别冲洗干净。柱子的检漏方法比较简单: 可将柱子泡在水里，堵死柱的一端，在另一端通气，若无气泡冒出即说明柱子无泄漏现象。

毛细管柱在使用前咨询生产厂家是否需要进行切除死堵和老化处理，如需要进行按照下述方法执行：

老化：连接好色谱柱，确保载气流通，先吹三到五分钟，吹去色谱柱表面的固定相，老化温度没有具体的规定，按照将要进行的分析方法的温度，进行老化，老化温度可以高于方法温度二十到三十度，不要超过色谱柱的最高使用温度，一般对于交联键和的柱子老化三个小时就够了，分子筛的和聚合物的柱子老化时间要长，具体咨询生产厂家。

切除死堵：在使用柱之前切除柱子前后两端的死堵部分后方可接入色谱仪使用。

通常都是这样

C18色谱柱使用的日常注意事项有哪些

在使用液相色谱C18仪柱过程中，须注意以下事项：

1、新C18色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到好状态。具体操作是，将配制好65%的乙腈/水冲洗后，把色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空（不可连上检测器，以免污染了检测器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干，过20分钟后再接上检测器，以1.0ml/min的流速，继续冲洗2~8小时；

2、液相色谱仪检测分析样品完毕后，须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；

3、若色谱柱处于长期闲置状态时，要将色谱柱冲洗，建议冲洗3-4小时以上，后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；?

4、由于C18柱的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响；由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；

5、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；

6、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲?洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。

新买的C18色谱柱在使用之前要怎样处理才能保护好它。

用甲醇：水=50:50（v/v)冲洗柱子，每次使用后都保存在甲醇：水=50:50（v/v)的流动相中。

色谱柱怕污染残留和柱压过高，残留每次使用后都用较高比例的有机相冲洗，然后在替换到50/50的甲醇/水中。柱压过高要尽可能避免。

其他就没什么了，C18柱子也不贵，除了超高压UPLC用的柱子。坏了就换新的呗，毕竟是消耗品。

氰基液相色谱柱在使用前怎么进行活化处理

氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的，这一点不

能忽略。对于新购柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要

使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很

高，适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，避免缓冲盐的析

出。

柱效检测：

流动相：10％乙酸乙酯＋90％正己烷

流速1.0

标准溶液：乙苯（或甲苯）＋苯甲酸甲酯

检测波长254nm

这个方法特别适用于新购柱子（新购柱子往往保存在正相溶剂中）时即进行检测，如有问题，可及时

与供应商沟通。

清

洗方法。

（1）

平时在正相条件下使用：

首先用50倍柱体积的异丙醇清洗，因异丙醇粘度较大需适当放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之

后，用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相，即可。

（2）平时在反相条件下使用：

缓冲盐应及时冲洗，不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等，属常识就不作特别交待。

用50倍纯甲醇冲洗；之后，用异丙醇过渡后，用二氯甲烷冲洗色谱柱；之后，再用异丙醇过渡回来到

甲醇条件下。

这些清洗方法，主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法，色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。

这是我现有资料里的，希望对你有所帮助！！！

新买的液相色谱柱，在实验之前要做怎样的处理

要先进行老化，最简单快捷的方法是用你准备跑样的流动相先平衡2个小时左右，再跑几针样品，直至主峰的保留时间稳定下来就可以用了。最好在使用之前测试下柱效，方便以后诊断故障或做比较。